08/45 流感抗 B（標(biāo)準(zhǔn)品）

產(chǎn)品時(shí)間：2022-03-08

簡(jiǎn)要描述：

NIBSC 07/184 流感抗 B（標(biāo)準(zhǔn)品）在綿羊中制備，用于單徑向B/Malaysia/2506/2004 抗原的擴(kuò)散測(cè)定。合適的 NIBSC試劑應(yīng)包含在每個(gè)測(cè)定中。抗血清試劑在 SHEEP 471、472 和 473 中制備至B/Malaysia/2506/2004 病毒的純化 HA。提取HA抗原通過(guò)用菠蘿蛋白酶處理和純化的純化病毒蔗糖梯度沉降

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流感試劑

流感抗 B/Malaysia/2506/2004 HA 血清（綿羊 471,472 和473)

NIBSC 07/184

細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

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